Capacity to proliferation and osteogenic differentiation of pluripotent mesenchymal cells of alveolar process periosteum, periodontal ligament and specimens of cancellous bone tissue was estimated during in vitro experiment. It has been concluded that all this types of cells are promising sources for application in maxillofacial and oral surgery.
У стоматології та щелепно-лицевої хірургії для відшкодування кісткових дефектів все більшого поширення знаходять технології з використанням мультіпотентних мезенхімальних стромальних клітин (ММСК). Найбільш частими джерелами їх виділення є кістковий мозок і підшкірна жирова тканина, що пов'язано з додатковою хірургічної інвазією для пацієнта. Тим часом, є дані, що вказують на наявність такого роду клітин і в різних тканинах порожнини рота, доступ до яких можна здійснити при плановій хірургічній санації ротової порожнини. Зокрема, при видаленні зубів верхньої і нижньої щелепи відкривається доступ для отримання матеріалу, що містить мультипотентні мезенхімальні стромальні клітини - биоптатов губчастої кістки (БГК), периодонтальної зв'язки (ПС) і окістя альвеолярного відростка (НК), які після проліферації in vitro можуть бути використані для приготування аутографтов. У цьому повідомленні наводяться попередні результати, що обгрунтовують таку можливість.
Далі за допомогою стерильних ножиць або стерильних щипців в ламінарному шафі (Babcock TVG 1.14.IS, ФРН) зразки подрібнювали до розміру не більше 1-2 мм. Середу видаляли і заливали зразки середовищем того ж складу, але додаванням колагенази 1 типу (Sigma, США) 1 мг / мл. Інкубували при 37 ° С протягом 30 хв. Після цього фрагменти переносили в конічну колбу, куди доливали 10 мл середовища DMEM ЕТС, центрифугували протягом 10 хв при 800 g при 4 ° С. Супернатант відкидали, осад знову ресуспендіровалі в 10 мл середовища з сироваткою, проводили повторне центрифугування, після чого осад ресуспендували в 5 мл ростової середовища описаного складу з додаванням 10 нг / мл людського рекомбінантного основного фактора росту фібробластів (ФРФо) (CellGenix, Німеччина) і поміщали в культуральний флакон площею 25 см 2 ( «Corning», США), який інкубували при 37 ° с в атмосфері з 5% вуглекислого газу в термостаті (Sanyo МСО-15АС, Японія). Середу у флаконі міняли кожні 3-4 дні. Після досягнення клітинами моношару їх пересівали використовуючи трипсин ( «ПанЕко», РФ) або суміш трипсин / версія ( «ПанЕко», РФ) за звичайною схемою.
Клітини з тканин всіх 3 типів досліджували на: здатність до колоніеобразованію -% колоній, що містять більше 16 клітин, при культивуванні 100 клітин 4-го пасажу; здатність до індукції остеогенной диференціювання - після інкубування в кондиційної середовищі без ФРФо. містить 50 мкМ аскорбат-2-фосфату, 10 мМ (З-гліцерофосфату і 0,1 мкМ дексаметазону з вимірюванням розмірів кісткових вузликів; активність лужної фосфатази (КФ 3.1.3.1) по McGadey (1970) і здатність експресувати матриксу до мінералізації - виявленням Са алізариновим червоним. Виявилося, що всі три джерела мають подібні властивості при деякій тенденції до більш високу здатність до костеобразовании у клітин з периодонтальної зв'язки і більш низькою - з біопатов губчастої кістки. Відзначено також зменшення здатності мультіпотентних мЕЗЕНХІМАЛЬНИХ х стромальних клітин до костеобразовании зі збільшенням віку донора.
1 Воложин Г.А. 2 Докторів А.А. 3 Десятниченко К.С. 1 Мкртчан Г.В.
1 Московський Державний Медико-Стоматологічний Університет, 2 ГЦ Медико-біологічних технологій, 3 НВО «полістиро», Київ
Незважаючи на поліетіологічность дегенеративно-дистрофічних захворювань кісток і суглобів, їх патогенез майже при всіх поразках має васкулярних природу. В основі відомих хірургічних методів.