Лабораторна робота №1
Правила роботи в мікробіологічній лабораторії.
Методи вивчення морфології мікроорганізмів і будови клітин
1. Вивчити правила роботи в мікробіологічній лабораторії і методи вивчення морфології мікроорганізмів.
2. Ознайомитися з пристроєм мікроскопа. Встановити світло по Кьолеру. Вибрати об'єктив, промікроскопувати і замалювати отримані зображення фіксованих препаратів:
а) Евглена Зелена;
б) Цвіль Мукор;
в) Бактеріальна клітина.
1. Правила роботи в мікробіологічній лабораторії і методи вивчення морфології мікроорганізмів
1.1 Правила роботи в мікробіологічній лабораторії
Робота в мікробіологічної лабораторії вимагає суворого дотримання спеціальних правил, що визначається двома основними положеннями.
Перше - в мікробіологічній практиці використовують, головним чином, чисті культури мікроорганізмів, т. Е. Популяції мікроорганізмів одного виду, часто є потомством однієї клітини.
Оскільки в повітрі, на поверхні навколишніх предметів, на одязі, руках, волоссі завжди є велика кількість різноманітної мікрофлори, то для забезпечення стерильності досліджень та уникнення забруднення культур робота повинна проводитися з дотриманням правил асептики.
Друге - при дослідженнях з не були ідентифіковані мікроорганізмами, при їх виділення з об'єктів навколишнього середовища і техногенних потоків, можуть бути виділені патогенні і умовно патогенні мікроорганізми.
Крім того, клітини як сапрофітних, так і патогенних мікроорганізмів можуть бути алергенами для певних індивідуумів. Таким чином, для отримання достовірних результатів досліджень, для забезпечення особистої безпеки і безпеки оточуючих необхідне дотримання певних правил.
Підготовка приміщення для проведення мікробіологічних робіт включає мокре прибирання і ретельну вентиляцію з подальшим опроміненням ультрафіолетовими променями бактерицидних ламп. Поверхня столу, де безпосередньо проводиться робота з культурами мікроорганізмів, слід дезінфікувати шляхом протирання 3% розчином хлораміну або 70% розчином ізопропілового або етилового спиртів.
Підготовку лабораторії до занять проводить лаборант; студенти, виконуючи завдання, повинні дотримуватися таких правил.
1. Кожен студент в мікробіологічної лабораторії працює на постійному місці, виконуючи завдання індивідуально.
2. На робочому місці не повинно бути сторонніх предметів (у тому числі портфелів і сумок).
3. Студент повинен працювати тільки в чистих халатах, волосся повинне бути підібрані, не падати на плечі.
4. При роботі з культурами мікроорганізмів необхідно дотримуватися всіх правил мікробіологічної техніки. На пробірках, колбах, чашках Петрі, матрацах повинна бути зроблено напис, що містить родові і видові назви культури, дату засіву, прізвище студента і номер групи.
5. Всі предмети, використані при роботі з живими культурами, повинні бути знезаражені або обпаленням в полум'я пальника (петлі, голки), або занурені в дезінфікуючий розчин (предметні і покривні скла, піпетки, шпателі).
6. Всі засіяні пробірки, чашки збожеволіють в термостат або здаються лаборанту. Відпрацьований матеріал (пробірки, чашки Петрі) також міститься в певні ємності за вказівкою лаборанта для їх подальшого знезараження.
7. У лабораторії забороняється куріння, прийом їжі, зайве ходіння по лабораторії.
8. У кінці заняття студент повинен привести в порядок робоче місце, вимити руки. Необхідно мати індивідуальне рушник, серветки для витирання рук.
1.2 Методи вивчення морфології мікроорганізмів
При вивченні морфології мікробних клітин використовують різні види мікроскопії, оскільки очей людини влаштований так, що не може чітко розгледіти дрібні предмети.
Неозброєним оком розглядаються предмети найчастіше з відстані так званого кращого бачення
250 мм. При нормальній гостроті зору очей може на цій відстані розрізняти деталі розміром не менше 0,15 мм. Розміри мікробних клітин можуть бути менш 0,1 мм. Для спостереження дрібніших деталей необхідно використання спеціальних засобів. Такими засобами є лупа і мікроскоп.
2. Пристрій мікроскопа
2.1 Мікроскопія у світлому полі. пристрій мікроскопа
Мікроскопія в світлому полі здійснюється в прохідному світлі. При виконанні завдань сьогодення практикуму кожен студент працює з мікроскопом (рис. 1).
Мал. 1. Мікроскоп
У мікроскопі розрізняють механічну, оптичну і освітлювальну частини.
Механічна частина включає штатив, предметний столик, тубус і систему гвинтів для пересування елементів мікроскопа. Штатив складається з підстави і нерухомо пригвинченого тубусодержатель. У верхній частині штатива розташовані тубус 2, куди вставляється окуляр 3, і револьверний пристрій 4, що складається з двох пластин. Нижня пластина обертається і має гнізда для об'єктивів 5, верхня закріплена нерухомо.
Предметний столик 6 пересувається в вертикальному напрямку за допомогою макро- мікровінта 7. Слід зазначити, що користуватися цим гвинтом треба дуже обережно, оскільки в мікроскопі макро- і мікрофокусіровкі суміщені. Діапазон переміщення грубої наводки становить 20мм, що відповідає 4,5 обороту макро- мікровінта. Механізм точного наведення можна привести в дію в будь-якому положенні грубої наводки за допомогою зміни напрямку обертання того ж гвинта.
На предметному столику є об'ектоводітель для предметного скла 8. За допомогою висять коаксіальних кнопок, розташованих ліворуч під предметним столиком, здійснюється переміщення об'ектоводітеля в поздовжньому і поперечному напрямках. Поруч з макро-мікрогвинти розташований гвинт конденсора 9, що забезпечує його розташування на потрібній висоті.
У мікроскопі є об'єктиви, що дають збільшення в 3,2, 10 і 40 разів, призначені для роботи з сухими системами, і об'єктив з чорною смугою для імерсійної системи, що дає збільшення в 100 разів.
При роботі з іммерсійним об'єктивом, після установки світла, при малому збільшенні вибирають ділянку на препараті, на вибране місце наносять краплю кедрової олії і обережно занурюють в неї фронтальну лінзу об'єктива 100х. Після закінчення роботи залишки масла з цієї лінзи видаляють, ретельно протираючи її м'якою тканиною.
Освітлювальний апарат знаходиться під предметним столиком і включає (див. Рис. 1):
- джерело світла у вигляді міньйон. Дана лампочка вмонтована всередині підставки, її яскравість можна регулювати за допомогою реостата 10, розташованого на задній панелі, там же розташований тумблер включення мікроскопа в мережу;
- конденсор Аббе; апертуру конденсора можна регулювати, відкриваючи й закриваючи діафрагму конденсора за допомогою важеля 12. Конденсор Аббе складається з двох лінз, укладених в металеву оправу і призначених для збирання променів світла, що йдуть від дзеркала;
- відбиває дзеркало, яке можна побачити в віконце 13. Кількість променів, що потрапляє на дзеркало, можна регулювати за допомогою діафрагми світлового поля. Важіль діафрагми позначений позицією 14.
2.2 Установка світла по Кьолеру
Найкращі результати при роботі з мікроскопом можуть бути отримані лише за умови правильного освітлення об'єкту. Кращий спосіб освітлення заснований на системі Келера. Остання включає наступні основні прийоми: а) отримання різкого зображення джерела світла (спіралі лампи на діафрагму конденсора; б) отримання різкого зображення діафрагми освітлювача в площині препарату.
Порядок установки світла по Кьолеру:
1. Включити в мережу.
2. Включити тумблер лампи.
3. Підняти конденсор вгору до упору гвинтом конденсора 9.
4. Відвести лампу широких полів і нейтральний світлофільтр.
5. Збільшити яскравість лампи реостатом 10.
6. Закрити апертурну діафрагму конденсора 12.
7. Відкрити діафрагму світлового поля до упору (установчий важіль 14).
8. Перевірити симетричність зображення світлової плями на нижній стороні апертурними діафрагми конденсора (при правильній орієнтації лампового патрона зображення світиться плями на нижній стороні апертурними діафрагми у вигляді спіралі і дзеркальне зображення розташовані паралельно один одному, якщо така умова не виконується, потрібно підняти мікроскоп і поворотом кільця поправити орієнтацію).
9. Поставити об'єктив 10х.
10. Зменшити яскравість лампи реостатом 10.
11. Установити препарат.
12. Відкрити апертурну діафрагму конденсора на 2/3 (важіль 12).
13. Сфокусувати мікрооб'єкт за допомогою механізму наведення (макро-мікрогвинт 7). Для цього розташувати об'єктив на відстані 1 см від препарату і, дивлячись в окуляр, повільно опустити препаратний столик, знаходячи зображення.
14. Закрити польову і апертурну діафрагму. В поле зору видно нерезкое зображення країв діафрагми світлового поля.
15. Сфокусувати зображення світлового поля за допомогою конденсора.
16. відцентрувати світлову пляму за допомогою центровочних гвинтів.
17. Відкрити діафрагму світлового поля, щоб краю світлої плями трохи заходили на поле зору (на 2/3 діаметра).
2.3 Зображення фіксованих препаратів
В результаті дослідження методу вивчення морфології і будови клітин методом мікроскопії були досліджені 3 фіксованих препарату.
1. Евглена Зелена
2. Цвіль Мукор
3. Бактеріальна клітина
Отримані наступні зображення:
Висновки: В ході даної лабораторної роботи були вивчені всі правила роботи в мікробіологічній лабораторії і методи вивчення морфології мікроорганізмів. Ознайомилися з пристроєм мікроскопа. Навчилися встановлювати світло по Кьолеру, вибирати об'єктив для кожного препарату і микроскопировать фіксовані препарати.
Виділення, вивчення властивостей мікроорганізмів і їх використання для виконання підготовчих.
Дипломна робота >> Біологія
емульсійного і мікробіологіческіхметодов знежирення. Застосування запропонованого методу знежирення. правила. забезпечують запобігання обсіменіння об'єктів зовнішнього середовища мікроорганізмами і особисту безпеку працюючого. Працювати в лабораторії.
Мікроорганізми. виділені з різних природних жирів
Дипломна робота >> Біологія
мікроорганізмів 2.2.2 Виділення чистої культури методом розведень 2.2.3 Посів на щільних середовища в чашки Петрі 2.2.4 Ізученіеморфологіі.
Гнійний бактеріальний менінгіт. Лабораторна діагностика
Реферат >> Медицина, здоров'я
вивчення основних. особливостями будови полисахаридной. В бактеріологічну лабораторію доставляється матеріал. типовою морфологііклеток і. роботі. методами класифікації мікроорганізмів. правою. мікробіологічної діагностики, доповненої методом.
Сорбційні властивості моху по відношенню до мікроорганізмів і важких металів
Робота з мікроорганізмами ведеться в спеціально обладнаних боксах і за допомогою спеціальних інструментів і допоміжних матеріалів (мікробіологічна петля.
Технологія роботи мідно-молібденового родовища Шорська
Курсова робота >> Геологія
морфології рудних тіл і геологічної будови. робіт. встановлення і вивчення. лабораторії входять: кернохраніліще, пробоподготовітельное відділення, лабораторія. методи. мікробіологічної активності. У процесі життєдіяльності комплекс мікроорганізмів. правил.
Шпаргалка >> Медицина, здоров'я
морфологію у вигляді великих і дрібних сферичних клітин. мікробіологіческіхлабораторіях. методи забарвлення застосовують для вивчення структури клітини і диференціації мікроорганізмів. Роботи Л. Пастера по вакцинації відкрили новий етап у розвитку мікробіології, по праву.
Дипломна робота >> Біологія
вивчення завжди були методи описової морфології. строеніяклеток і клітинних структур, наприклад, будова. роботи стало виділення і ідентифікація дріжджових мікроорганізмів в лабораторії. Правілаработи с. Нові методимікробіологіческого контролю.
Виділення спорових мікроорганізмів грунту печери Баскунчакская (Астраханської області)
Курсова робота >> Біологія
правило. знищені на поверхні землі; на підставі вивчення пухких відкладень печер, їх будови. необхідно провести стерилізацію мікробіологічної посуду і середовищ, які використовуються в подальшій роботі. 2.2.2 Методи стерилізації Стерилізація або.
Природа, морфологія і основні властивості бактеріофагів. Механізм дії.
основою для вивчення властивостей. бактеріологічних лабораторій для. всі властивості мікроорганізмів - морфологіяклеток. будова колоній. поліпшення роботи кишечника (. як правило. застосовують. М., 1967; Мікробіологіческіеметоди дослідження при інфекційних.
Навчальний посібник >> Медицина, здоров'я
мікроорганізму. Бактерії мають складну антигенну будову. Відповідно до морфологіеймікроорганізма. Як правило. запальним. мікроорганізмів. МЕТОДИ. інститутах і лабораторіях. Історія вивчення хвороби. клітин. В іншій роботі. мікробіологічних.